熒光標(biao)記(ji)(ji)時,肽和修飾標(biao)記(ji)(ji)的(de)染料之(zhi)間需要加一(yi)個(ge)間隔(ge)嗎?
多(duo)(duo)(duo)數染料(liao)屬于大分子量芳香族氨基(ji)酸(suan)(suan),在多(duo)(duo)(duo)肽(tai)中(zhong)引(yin)入這一類大型分子,為了避免多(duo)(duo)(duo)肽(tai)與標簽之(zhi)間發生相(xiang)互作(zuo)用,維持蛋(dan)白的構象(xiang)及(ji)其生物學(xue)活(huo)性(xing),我們(men)推薦引(yin)入一個(ge)可(ke)彎曲的間隔區,比如Ahx, Ahx是一個(ge)含有6碳分子的環(huan)狀結構,可(ke)以維持熒光標簽的穩(wen)定性(xing)。否則,FITC很容(rong)易結合多(duo)(duo)(duo)肽(tai)序列(lie)中(zhong)的半胱氨酸(suan)(suan)殘基(ji)或者(zhe)賴氨酸(suan)(suan)殘基(ji)。
通常情況下,生物素、FITC一類的染料既可以標記在蛋白的氨基端也可以標記在蛋白的羧基端。然而,為了在*短時間內,*便捷又高效地合成多肽,***推薦客戶選擇標記在氨基端。因為一個多肽的合成往往是從羧基端開始的,這樣一來,氨基端的修飾便成為*后一個環節,不需要再進行特別的結合作用。反之,羧基端修飾需要額外的環節,因此過程更加復雜。