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多肽修飾

       多肽是生物體內實現各種功能的活性物質,多肽修飾主要是肽鏈主鏈結構和側鏈基團的修飾。通過修飾能夠改變肽
類化合物的物理化學性質,優化其(qi)在體內的(de)有(you)效(xiao)利用。經過(guo)修飾的多肽類(lei)藥(yao)物,能(neng)夠顯著降(jiang)低免疫原性(xing)、減少(shao)毒負作用、
增加(jia)水溶(rong)性、延長體(ti)內作用(yong)時間、改變體內(nei)分布狀況等(deng)(deng)等(deng)(deng)。常(chang)見的肽修飾包括:C末端(duan)修飾、N末端(duan)修飾、中間殘(can)基修飾,
以及環化修飾。
     
      除了常規線性(xing)肽之外,合生生物(Synthbio)現足(zu)以(yi)滿足(zu)您對多(duo)種環肽(tai)、修飾(shi)肽(tai)和特殊肽(tai)的(de)需(xu)求,包括:N/C端修
飾、抗原肽、熒光(guang)標(biao)記(ji)、環肽、生物素標(biao)記(ji)和PEG化等(deng)。合生(sheng)(sheng)生(sheng)(sheng)物提供的多(duo)肽修(xiu)飾(peptide modification)服務包含
但不局(ju)限(xian)于(yu)以下類型:

☆N端修飾/C端修飾

☆二硫鍵修飾

☆酰胺鍵成環

☆熒光標記

☆生物素標記多肽

☆載體蛋白偶聯和MAPs

☆非天然氨基酸/D型氨基酸

☆磷酸化修飾和(he)磺酸(suan)化修飾

☆Linker,spacers PEGylation

☆穿膜肽

 

 











1、酰胺(an)化和乙酰化

如果合成多肽為蛋白質的內部序列(lie),通(tong)過N端乙酰化或C端酰胺化可以去除(chu)多(duo)肽電(dian)荷使其更(geng)趨(qu)向于蛋白質的自然(ran)結構,同時增強了多(duo)肽對肽鏈內切酶的抵抗(kang)力。

2、生物素及FITC標記
Biotin/Fitc一般直接修飾在多肽的N端,為了有(you)效的標記(ji)N端(duan),可(ke)在多肽的N端(duan)和熒光基團之(zhi)間(jian)插入(ru)七碳的6-氨基己酸(suan)。Lys(Fitc)/Lys(Biotin)修飾在多肽的C端,這樣就消除了賴氨酸(suan)的正電荷。

3、二硫鍵修飾
在(zai)半胱氨(an)酸(suan)殘基間形成二硫(liu)鍵可以實(shi)現多肽(tai)環化,但由于(yu)(yu)二硫(liu)鍵是隨(sui)機形成的,因此對于(yu)(yu)含多個半胱氨(an)酸(suan)殘基的多肽(tai)來說,這是(shi)個挑(tiao)戰。合生(sheng)生(sheng)物可(ke)在(zai)指(zhi)定的半胱(guang)氨(an)酸(suan)間構建定點二硫(liu)鍵,合(he)生生物成功在一條多肽定(ding)位(wei)引入三對二硫(liu)鍵。同時不同序列之間形成多肽二硫(liu)鍵,例如胰島素的合(he)成。我(wo)們也(ye)有非常豐富(fu)的經驗。

4、多種磷酸(suan)化
多肽磷(lin)酸化(hua)可以幫(bang)助研究(jiu)磷(lin)酸化(hua)對(dui)多肽和蛋白(bai)結(jie)構(gou)的影響以及蛋白(bai)激酶的作(zuo)用機理,對于序列中含有(you)多個(ge)含羥基的氨基酸(S,T,Y),可以(yi)通過正交保護(hu)或(huo)使用被Fmoc保(bao)護的磷酸(suan)化氨(an)基酸(suan)原(yuan)料來實現序列中磷酸化氨基酸的選擇性。合生(sheng)生(sheng)物已經成(cheng)功地為客戶合成(cheng)了多磷酸化修飾多肽。

5、甲(jia)基(ji)化(hua)修飾
蛋白(bai)質(zhi)的(de)甲(jia)基化被認為是一種重要的(de)修飾(shi),有(you)助于(yu)調節細胞功能,如(ru)轉錄(lu)、細胞分裂和細胞分化。甲(jia)基(ji)化修飾蛋(dan)白的多肽可(ke)用(yong)(yong)于蛋(dan)白質-蛋(dan)白質相互(hu)作用(yong)(yong)研究、或X射(she)線晶(jing)體學結構測(ce)定。合生生(sheng)物可以合成含有單(dan)個、二個、三個甲(jia)基化(hua)賴氨酸的多(duo)肽。

6、KLH, BSA,OVA多肽偶聯(lian)
多(duo)肽(tai)抗(kang)原(yuan)由于分子(zi)太(tai)小而(er)不(bu)能產生(sheng)顯(xian)著的免疫反(fan)應,因此(ci)需(xu)要(yao)將(jiang)多(duo)肽(tai)抗(kang)原(yuan)偶聯到BSA、OVA、KLH等較大(da)的蛋白載體(ti)上。KLH由于在ELISA或Western blotting檢測中沒(mei)有抑制作用,所(suo)以不(bu)影響檢測結果。常用的偶(ou)聯(lian)原理(li)是馬來酰亞胺法,即將多肽中的半胱氨酸殘基與(yu)載體(ti)蛋白偶聯。因此合成抗原多(duo)肽時,在(zai)其N端或C端添(tian)加一個半(ban)胱氨酸殘基有(you)利于(yu)多肽(tai)與載體蛋白的偶聯。
注:KLH是一種(zhong)很大的凝聚(ju)蛋白,由于它特(te)殊的大小及結構,其水溶性有限,往(wang)往(wang)樣品(pin)會呈現溶液(ye)狀或者含絮狀的混懸(xuan)液,但這(zhe)并不影(ying)響免疫原性。

7、聚乙二醇(PEG)修飾 
PEG聚合體(ti)具有(you)非離子(zi)性(xing)的、無毒性(xing)的、無生物排斥、高親水(shui)性(xing)的等,PEG修飾(shi)通過化學(xue)方法將(jiang)PEG聚合物偶聯到大分子(zi)上(抗體、多(duo)肽(tai)等)。PEG修飾的(de)大分子具有較高的(de)溶解(jie)性及生(sheng)物藥效,可通過偽裝多肽(tai),騙過宿主細胞的(de)免(mian)疫系統,來增強多肽的治療效果(guo)。它(ta)也(ye)可以(yi)通過降低腎臟(zang)清除率(lv)來延長多肽的(de)代謝時間(jian)。

8、穩(wen)定同位(wei)素標記(ji)
為了進(jin)行(xing)核磁(ci)共振實(shi)驗,合生生物將多肽標(biao)(biao)記穩定(ding)的(de)非(fei)放(fang)射(she)性的(de)同(tong)位素。標(biao)(biao)記2H、15N、13C或(huo)15N及13C同(tong)時標(biao)(biao)記的(de)多肽,合成后(hou)可以便(bian)于(yu)核(he)磁共振檢測。如果您需(xu)要(yao)標記(ji)修飾,請(qing)提(ti)供您的序列及標記需求。

9、復合抗原肽修飾
多抗(kang)原(yuan)肽(tai)(Multiple-Antigen peptide, MAP)是生產(chan)高(gao)效價的(de)抗(kang)多肽(tai)抗(kang)體和多肽(tai)疫苗的(de)一種(zhong)有效方法。根據賴(lai)氨酸的數(shu)目(mu),可以合成不(bu)同(tong)數(shu)目(mu)側鏈的多抗原肽,這樣(yang)不(bu)必(bi)將(jiang)抗(kang)原偶聯到載體蛋(dan)白(bai)質便能產生高(gao)滴度、高(gao)親和力的(de)抗體。


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