載體蛋白偶聯和MAPs

載體蛋(dan)白偶聯

肽(tai)-載體(ti)蛋(dan)白銜接(jie)多用于制備(bei)抗(kang)毒素類抗(kang)體(ti)，單獨的單個通常(chang)通常(chang)小小的不足以(yi)激起充分(fen)的免(mian)疫反(fan)應，而(er)帶(dai)有很多抗(kang)原

表位(wei)的載體蛋(dan)白(bai)有利于刺激輔助性T細胞，進一步誘導B細胞免(mian)疫反應。

合(he)生(sheng)(sheng)生(sheng)(sheng)物偶聯蛋白主要如下幾(ji)種：

KLH（Keyhole Limpet Hemocyanin），即血藍蛋白，由于KLH比BSA有更高(gao)的免疫(yi)原性，因此是常被替(ti)換的載體蛋白。

BSA（牛血清白蛋白），即牛血清白蛋白，屬于十分穩定的和可溶的白蛋白。BSA的不利之處在(zai)于在(zai)很多實(shi)驗中，它被當

作封閉劑(ji)使用，如果多肽-BSA偶聯(lian)物的抗(kang)血清用于這樣的檢測分析中，通常(chang)會出現(xian)假陽性，因(yin)為這些血清含有抗(kang)BSA的

抗體。

OVA（Ovalbumin），即雞卵白蛋白，它可作為第*二載體蛋白去驗證抗體是否僅針對靶向而并非載體蛋白（如BSA）。

所有可攜帶的基基反應的功能(neng)基團(tuan)經修飾都(dou)可被替換為發生(sheng)共軛反應。合生生物(wu)偶聯反(fan)應，其中十分常見的有(you)以下幾種：

碘乙(yi)酰(xian)胺(an)（碘乙(yi)酰(xian)胺(an)）

馬(ma)來(lai)摻雜(za)（馬(ma)來(lai)酰亞胺）

烷基鹵(lu)（鹵(lu)代烷）

MAPs分支肽

多(duo)種抗(kang)原(yuan)肽（MAP）是(shi)人工分支的肽，其(qi)中Lys殘基用作支架核心，以(yi)支持形(xing)成具有不同或相同肽序列(lie)的≤8個分支。

多種抗原肽已被用(yong)于生產(chan)用(yong)于免疫學研究的抗體。MAP具有高的肽抗原與(yu)核心分子摩(mo)爾比，并(bing)且不需要載體蛋白(bai)來

引(yin)發抗(kang)體應答。

自然界(jie)中沒有已知的分(fen)支蛋白，合(he)生(sheng)生(sheng)物通過化學(xue)連接策(ce)(ce)略解決了這個(ge)問題，該策(ce)(ce)略可以(yi)提高產(chan)率生產(chan)所需的肽(tai)樹(shu)狀大

分子。然后，分(fen)支結構可以形(xing)成分(fen)子量增(zeng)加的蛋(dan)白(bai)質以引(yin)發免疫原性應(ying)答。

MAP與帶有載體蛋(dan)白的(de)肽

在(zai)支鏈賴氨酸上合成(cheng)四(si)或八個(ge)拷貝的(de)肽；因此，MAP肽(tai)的(de)作用(yong)類似于大蛋白(bai)。

MAP肽直接與佐劑一起注射以產(chan)生抗體(ti)。不(bu)需(xu)要載體(ti)蛋白。

MAP技(ji)術有利于N末端或內部肽(tai)，因(yin)為該肽(tai)通(tong)過C末端連接。相反，KLH-結合傾向于C-末端肽。但是，KLH載(zai)體可(ke)能(neng)會

引起空間位阻(zu)。

由于MAP肽的結構，其(qi)滴度可(ke)能比KLH綴合(he)的肽(tai)略高。MAP設計大(da)大(da)程度地提高了(le)抗(kang)原濃度，因為(wei)合成的(de)肽(tai)抗(kang)原占(zhan)所得

產品總重量的95％。

使用(yong)MAP，每次都可以(yi)使用已(yi)知量(liang)的肽進(jin)行免疫，從而可以(yi)更好地控(kong)制實驗條件。

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