多肽(tai)是如何純化的(de)?
多肽(tai)純(chun)化一般(ban)使用反相柱(如C8,C18等),214nm。緩沖體系通常為含TFA的溶劑,pH2.0。Buffer A為含0.1%TFA in ddH2O,Buffer B為1%TFA/ACN/pH2.0。純(chun)化前用Buffer A溶解;如果溶解不好,用Buffer B溶解后,然后用Buffer A稀(xi)釋;對疏水性強的多肽(tai),有(you)時還需要加入(ru)少量(liang)的Formic Acid或醋酸。HPLC分(fen)析多肽(tai)粗產物,如果多肽(tai)不長(15aa以(yi)下),一般(ban)會(hui)有(you)主峰(feng),主峰(feng)通常為全(quan)長產物;對于(yu)20aa以(yi)上(shang)的長肽(tai),如果沒有(you)主峰(feng),HPLC需搭配Mass來判定分(fen)子(zi)量(liang),進而確定哪(na)個峰(feng)是所要合(he)成的多肽(tai)。